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菌落計數方法的具體操作步驟及注意事項

更新時間:2024-09-29      瀏覽次數:17724
      現今,對菌落的研究越來越多,研究菌落的方法也越來越多,下面我們來具體說說菌落計數方法。菌落計數方法是將待測樣品適當稀釋后,取一定量的稀釋液涂布到平板上,每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落代表原樣品中的一個單細胞,即菌落形成單位(colony-forming units,CUF)。該方法是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的,菌液中的死亡細菌或無繁殖能力的細菌不包括在內。

菌落計數方法操作方法如下:
1、取一定量(如100μl)的菌懸液,進行10×倍梯度系列稀釋;
2、取一定量(如100μl)稀釋液均勻涂布于平板培養基,每個稀釋度至少涂3個平板;
3、根據待計數細菌的培養特性,將涂好的平板放置于適當的條件下進行培養;
4、待平板上長出菌落后,選取稀釋度合適的平板(通常菌落數為數十至數百個之間),數平板上的菌落數,根據稀釋度和涂平板的液體量,換算出原始菌液中的活菌數。通常單位是CUF/ml,即每ml原始菌液中有多少個活菌數。
菌落計數方法的注意事項:
1、一般選擇每個平板上長有30-300個菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較為合適。
2、同一稀釋度的三個重復對照的菌落數不應相差很大,否則表示試驗不。
3、為了減少誤差,同一稀釋度重復對照平板建議不要少于3個。
4、計數稀釋度平板的菌落數與上下相鄰稀釋度平板的菌落數基本呈10倍量關系,否則表示稀釋度不準確。
以上就是菌落計數方法的操作步驟及注意事項,希望對大家有所幫助。
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